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[单选题]
用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化（)
A.核酸内切酶
B.核苷酸激酶
C.核酸外切酶
D.末端转移酶
E.碱性磷酸酶
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A.核酸内切酶
B.核苷酸激酶
C.核酸外切酶
D.末端转移酶
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A.引入某些限制酶切位点
B.人工构建载体
C.增加调控元件
D.调整阅读框
E.通过接头引入与目的基因相同的限制酶位点，并对目的基因相应酶切点进行甲基化修饰保护，可保护目的基因不受限制酶破坏
A.引入某些限制酶切位点。
B.人工构建载体。
C.增加调控元件。
D.调整阅读框。
E.通过接头引入与目的基因相同的限制酶位点，并对目的基因相应酶切点进行甲基化修饰保护，可保护目的基因不受限制酶破坏。
A.目的基因获得
B.表达载体构建
C.目的基因导入宿主细胞
D.筛选稳定表达的细胞
A.星号效应是在非最优条件下某些限制性内切酶对识别和切割序列的特异性上升的现象
B.连接酶连接限制性内切酶切割产生的粘性末端的连接效率比平末端高
C.在连接质粒和外源DNA的限制性内切酶酶切后的片段时，应该把此两种DNA按1:1的摩尔比混合进行连接反应
D.已知某限制酶在一环状DNA上有3个识别位点，因此在该酶切割这一环状DNA时，可得到4个片段
A.高纯度DNA
B.载体与目的基因摩尔数之比为1：1
C.载体与目的基因摩尔数之比为1：3~5
D.连接反应体系中DNA浓度较高
E.连接反应体系中DNA浓度较低
